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基本介绍
病理学从研究对象区分，可以分为人体病理学和实验病理学，作为科研工作者，实验病理学是我们研究的主要方向。
实验病理学以实验动物模型、体外培养细胞、组织和器官为研究对象。动态的研究人体疾病的发生发展规律。
实验病理学的整体技术小编归纳为两大类，一是制片技术、另一是染色技术。
下面将从这两个方向为大家做整体介绍。
01制片技术
· 制片方法
病理制片方法种类较多，如火棉胶切片、碳蜡切皮、石蜡切片、超薄切片、冷冻切片等等。
不同实验特点选择不同的制片技术。
广泛的制片技术为组织石蜡切片和组织冷冻切片。
· 组织石蜡切片
在制备石蜡切片前，需要良好的样本处理方式。
大多采用甲醛固定的方法，大家可以选择10%中性福尔马林固定液或者使用4%多聚甲醛固定液。
固定时间小编建议24-48h，尽量避免长时间的固定，可能造成抗原的丢失。
· 组织冷冻切片
冷冻切片常用于特殊的染色技术，如油红O染色、酶化学染色（线粒体、呼吸相关等等）及荧光类染色。
制备冷冻切片的样本同样需要良好的前处理，一般可以选择与石蜡切片相同的样本处理方式，另外可以直接将样本液氮速冻，置于-80℃保存。
同样不建议长期保存，减少抗原的丢失。
02染色技术
· 分类
制备好的切片可以用于后续病理染色，通过染色更直观的观测到组织细胞形态结构、多肽、酶及蛋白质含量的变化，达到准确定位、定性和定量的研究目的。
随着新技术新手段的出现，染色方法也不断发展，但总结归纳起来，常见的病理染色技术可以分为五大类：常规染色、特殊染色、组织化学染色、免疫组织化学染色及原位杂交技术。
· 常规染色
常规染色是基础的病理染色方法，即苏木素-伊红染色（HE染色），通过两种染料对细胞结构的细胞核及细胞质染色呈现的不同颜色，进而呈现整体组织的形态结构，通过与正常组织结构形态的对比，分析组织疾病等的病理改变。
· 特殊染色
特殊染色是对组织细胞中的特定结构、成分进行区分。特殊染色种类繁多，比如masson染色、Nissl染色。油红O染色、天狼猩红染色、PAS染色、Giemsa染色等等。通过不同染色方法呈现不同的结构特征，如显示纤维组成、神经元尼氏体、脂质的堆积、糖原的沉积、炎性细胞的种类等等。使得特殊染色成为病理染色及病理鉴定当中十分重要的一种手段。由于特殊染色的种类之多，染料颜色之丰富，下面随小编一起来欣赏欣赏这些多彩的特染世界。
· 组织化学染色
组织化学染色是基于酶化学反应的染色技术，对于大多数酶如线粒体酶、细胞色素氧化酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶等等均可以采用组织化学的染色方法进行染色。该类染色为保证组织内酶活性，通常都是使用冷冻切片进行染色。
· 免疫组织化学染色
免疫组织化学染色是常用的用标记的抗体（或抗原）对细胞或组织内的相应抗原（或抗体）进行定性、定位或定量检测方法；通过显色反应之后，用显微镜、荧光显微镜观察的染色方法。
根据显色体系的不同可将免疫组织化学染色分为化学显色法IHC及免疫荧光染色。由于荧光标记物在不同波段下显示的不同荧光，又发展出免疫荧光单染、免疫荧光双染及多重免疫荧光染色，使得在同一组织下能够同时显现多个抗原或蛋白的表达情况。
· 原位杂交
原位杂交（In Situ Hybridization）也称为原位杂交组织化学，是指以特定标记的已知核酸序列为探针，原位检测细胞涂片或组织切片中核酸（DNA/RNA）的技术。常用的标记物有放射性标记物、生物素、地高辛、荧光标记物，酶类等。通过显微镜或荧光显微镜进行定位观察。
